Após o estabelecimento da primeira cooperação entre o KMT e o PCCh, o PCCh continuou a liderar os movimentos de trabalhadores e de massas em todo o país. Em 1 de maio de 1925, a Federação dos Sindicatos de Toda a China foi oficialmente fundada em Guangzhou, com os militantes do PCCh Lin Weimin e Liu Shaoqi tendo sido eleitos como presidente e vice-presidente. Em 15 de maio, capitalistas japoneses da 7ª Fábrica de Fios de Algodão de Shanghai mataram a tiros Gu Zhenghong, então representante dos trabalhadores para negociações e membro do PCCh, e feriram mais de 10 outros trabalhadores. O Comitê Central do PCCh decidiu então realizar uma grande manifestação anti-imperialista na zona da Concessão Internacional. No dia 30 de maio, trabalhadores e estudantes de Shanghai saíram às ruas em uma grande manifestação de propaganda. Em consequência disso, agentes da polícia inglesa da Concessão abriram fogo contra os manifestantes na rua Nanjing, matando 13 grevistas e ferindo inúmeras pessoas, causando a grande “Tragédia de 30 de Maio” que chocou todo o país. Nos dias seguintes, ocorreram sucessivos tiroteios e a morte de cidadãos chineses pelas polícias britânica e japonesa em Shanghai e em outras cidades da China.
Essas tragédias deixaram o povo de todo o país extremamente indignado. O Comitê Central do PCCh decidiu formar uma Comissão de Ação composta por Qu Qiubai, Cai Hesen, Li Lisan, Liu Shaoqi e Liu Hua para organizar um movimento de protesto envolvendo greves de trabalhadores, estudantes e comerciantes em Shanghai. Sob a liderança e promoção do PCCh, o Movimento de 30 de Maio se espalhou rapidamente por todo o país, com cerca de 17 milhões de pessoas participando diretamente nele, gerando uma onda nacional de indignação e uma luta anti-imperialista com grande influência internacional.
A influência do PCCh foi reforçada e expandida durante o Movimento de 30 de Maio em todo o país, com o número de membros do Partido aumentando dez vezes em um ano. O Movimento promoveu diretamente a eclosão das greves gerais de Guangzhou e Hong Kong, que duraram 16 meses e contaram com a participação de 250 mil pessoas, tendo desempenhado um importante papel na formação do clímax da Grande Revolução Chinesa.
五卅运动
第一次国共合作建立后，中国共产党继续领导全国的工人和群众运动。1925年5月1日，中华全国总工会在广州正式成立，共产党员林伟民、刘少奇分别当选为正、副委员长。5月15日，上海内外棉七厂的日本资本家枪杀工人代表、共产党员顾正红，打伤工人10余人。中共中央决定在租界内举行大规模的反帝示威活动。5月30日，上海工人和学生举行街头宣传和示威游行，租界的英国巡捕在南京路上突然开枪，打死13人，伤者不计其数，制造了震惊全国的五卅惨案。此后几天，在上海和其他地方又连续发生英、日等国军警枪杀中国人的事件。
这些事件，激起了全国人民的极大愤怒。中共中央决定由瞿秋白、蔡和森、李立三、刘少奇和刘华等组成行动委员会，组织全上海工人罢工、学生罢课、商人罢市的抗议运动。在中国共产党的领导和推动下，五卅运动迅速席卷全国，约有1700万人直接参加了运动，形成了全国规模的反帝怒潮和具有广泛国际影响的反帝斗争。
五卅运动扩大了中国共产党在全国的影响，党员数量一年内增加了10倍。这一运动直接推动了历时16个月、25万人参加的省港大罢工的兴起，对大革命高潮的形成起到重要的推动作用。